新闻资讯
当前位置:主页 > 新闻资讯 >
小鼠固定架,小鼠固定器的生产厂家有哪些?
来源:未知 |发布时间:2021-04-07 13:51|点击:
  CCK与焦虑症的发病机制相关,作为CCK受体最主要的一种亚型,CCK-2 受体被认为在操控焦虑行为等方面扮演重要角色16。Tet诱导调控系统包括Tet-on(rtTA)系统和Tet-Off(tTA依赖)系统,是最常用的药物诱导型转基因表达系统之一。此次实验模型dtg小鼠亲代构建采用的Tet-Off系统已被广泛用于许多哺乳动物和转基因动物中的可逆诱导基因表达。
其利用tTA/tetO诱导型基因表达系统来产生诱导型前脑特异性CCKR-2转基因小鼠,建立了两种单转基因小鼠品系(a-CaMKl/tTA和tetO-CCKR-2),再由此两种单转基因小鼠杂交出tTA /tet0-CCKR-2半合子双转基因小鼠189。由于焦虑症人体实验的局限性,一个较好的遗传动物模型应用对研究焦虑症机制及相关药物疗效、代谢、毒理等试验显得非常重要,因此,正确选择实验动物模型是进行研究实验的前提,成功繁殖和正确饲养dtg小鼠及其生命体征的揭示是利用该模型进行相关研究的基础。此次实验通过对dtg小鼠子代基因型及组织学的完整鉴定以及饲养过程中寿命的观察并分析其生存率,为进一步繁育及使用该模型对焦虑症、恐惧行为等进行研究的实验设计等提供有益参考,对焦虑症发展等神经分子机制的研究以及对今后临床对焦虑症治疗干预等都具有重要意义。
  小鼠固定器
  基因组DNA鉴定方式有多种(如Southern法和酚氯仿提取法等),且均各有不同程度的优缺点[191。此次实验采用的鉴定方式具有准确、便捷和低成本等优点,且电泳结果条带显示与预期目的基因片段大小一致,表明通过鼠尾提取DNA、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳鉴定的方法可以用于dtg小鼠模型的基因型鉴定。
另外,成功建立的可以应用于焦虑症相关疾病研究dtg小鼠模型,其CCKR-2转基因表达应为前脑特异性的,因为a-CaMKII阳性细胞主要是前脑的兴奋性神经元。因此,鉴定此模型除了需要确认子代小鼠基因组DNA片段大小外,还需有确认CCKR-2转基因在dtg小鼠中的表达模式。原位杂交使用的35S标记的寡核苷酸探针(β-球蛋白poly-A),可以特异性识别转基因CCKR-2,但不能识别内源性CCKR-2。此次实验结果显示与WT小鼠相比,在dtg小鼠前脑区域观察到更强烈的杂交信号,表明CCKR-2转基因表达是前脑特异性的,进一步说明以上鉴定方法可以应用与此模型子代的鉴定。
  
  转基因技术是指宿主细胞的基因组接受并稳定整合外源基因,且在下一代予以表达,引起生物体可遗传性状改变的基因操作技术,而动物转基因技术更是早已成为生物医学研究领域的研究趋向l20。转基因动物模型被广泛应用于各种临床及基础研究实验中,以期更好地模仿、研究人类疾病奠定基础。由于导入基因、品系及种别的不同,各种转基因动物的生存时间可以不同。
神经系统相关疾病研究显示,转基因诱导可以不同程度缩短实验小鼠寿命,如缺少FgfrL1基因外显子3编码的lg结构域的转基因小鼠寿命缩短2,3xTg-AD 转基因小鼠患有免疫系统功能障碍可能导致生存时间的降低(21, Tg 2576转基因小鼠和5xFAD转基因小鼠的中位生存时间显著小于对照组B6SJL野生型小鼠的中位生存时间因。另外,同一转基因模型不同性别的实验动物之间可能因为基因突变的性别差异导致转基因诱导对其生存时间的影响不同(24,如3xTg-AD转基因小鼠雌性小鼠的死亡率要低于雄性小鼠22,APP/PS1转基因模型(TASTPM)雄性小鼠到300d时死亡率为10%,雌性的死亡率为45.5%,对照组小鼠的死亡率为0%25。
虽然转基因随机插入小鼠基因组中可能会破坏另一个重要的基因座而对神经元的发育产生影响,但课题组前期的研究显示,该实验模型,转基因过表达和随机基因组整合均不会导致小鼠神经元发育缺陷。此次实验以WT小鼠作为对照,观察2年内dtg小鼠的自然寿命并分析其生存曲线,结果显示雌、雄dtg小鼠中位生存时间分别为76周和77周,其生存率均随小鼠的年龄增长而降低,且均分别明显低于对照组雌、雄WT小鼠的生存时间,均有明显统计学差异。其具体原因尚不清楚,转基因后外源基因是否对动物的饮水、饮食、代谢功能等造成了影响也不明确,还有待进一步观察、分析和相关机制研究;但雌、雄dtg小鼠间的生存时间差异无统计学意义。
因此,利用dtg小鼠模型进行相关研究的实验设计时,需控制实验时间在此动物模型观察寿命内进行,还应考虑随年龄的增加其生存概率变化对实验的影响等。另外,此动物模型性别间寿命差异暂无统计学意义。
  小鼠固定架
  总之,dtg 小鼠子代可以通过原位杂交鉴定CCKR-2转基因在前脑特异性表达,并通过取鼠尾进行PCR扩增的方法鉴定其是否符合预期模型基因型。并且,tTA/tet0-CCKR-2 双转基因诱导可能会降低小鼠的生存概率并缩短其生存时间,但基本也都在50周龄以后才出现死亡现象。另外,对不同性别dtg小鼠之间的寿命影响差异不明显。以上结论对实验室繁育该品系小鼠及使用该模型对焦虑症、恐惧行为等进行研究的实验设计等提供了重要参考依据。
当然,此次实验存在于非自然环境的人为控制因素下,受饲养条件、实验时间及其数量等的影响和限制,可能对小鼠的寿命也存在一定影响,比如,按只数分笼饲养可能会影响小鼠在自然状态下的接触与交流,按性别分笼饲养可能阻断了小鼠自然状态下的雌雄交配及情感交互等。另外,观察时间内发生的不可控因素,如其他疾病的发生和相互间的精神状态及打架争斗也可能影响实验小鼠的自然死亡寿命,故实验结论还有待更多的数据来完善与支撑。

在线客服

  • 客服一: QQ
  • 客服二: QQ
  • 客服三: QQ
  • 0371-55692663
  • 13213170223