啮齿类动物手术器械贵吗？
来源：未知 |发布时间：2021-04-10 10:21|点击:次
1 C57BL/6 J x SJL/J背景K18-hACE2转基因小鼠2007年，爱荷华大学的MeCray等成功构建K18-hACE2转基因小鼠，由人类细胞角蛋白18( cytokeratin 18, K18)启动子调控的hACE2转基因小鼠。将携带有人ACE2编码基因的载体引人到野生型(c57BL/6J与SJL/J杂交品系的F2)小鼠中构建。ACE2的表达由人细胞角蛋白18(K18)启动子调控在上皮细胞中表达，K18启动子可在气道上皮细胞(但不在肺泡上皮细胞)以及其他内脏(包括肝、肾和胃肠道)的上皮细胞中高效表达外源转基因。
McCray等研究发现，在最初感染的气道上皮细胞中便观察到hACE2表达。该K18-hACE2转基因小鼠鼻内接种人源SARS-CoV毒株后会迅速感染并死亡，但野生型小鼠感染SARS-CoV病毒后，其肺泡中并未检测到病毒抗原。该研究中，病毒感染开始于气道上皮，随后扩散到肺泡，最终蔓延至大脑。感染导致肺部巨噬细胞和淋巴细胞浸润，并引起肺部和脑部的促炎细胞因子和趋化因子上调。感染3~5d后，K18-hACE2小鼠出现体质量减轻，并伴有呼吸困难和精神萎靡，7 d内全部死亡。虽然,，SARS-CoV起的肺部病理变化却有限，且最后受感染的K18-hACE2转基因小鼠死亡的主要原因是中枢神经系统感染后导致神经元死亡，而新冠病毒感染患者死亡主要原因是感染后的肺脏炎症。
2 C3H x C57BL/6背景HFH4-hACE2转基因小鼠
美国病毒学家北卡罗纳大学的Sheahan等构建的(C3HxC57BL/6)F1背景hACE2转基因小鼠，命名为HFH4-hACE2转基因小鼠。该小鼠使用肺纤毛，上皮细胞启动子HFH4启动人源ACE2基因在小鼠肺中的转基因小鼠表达，该HFH4-hACE2转基因小鼠肺中虽观察到人ACE2的有效表达,但没有表现出预期的肺部特异表达,在脑、肝、肾和胃肠道中也检测到不同程度的人ACE2表达。同时，在HFH4-hACE2转基因杂合子小鼠中偶尔检测不到人类ACE2基因的表达。在HFH4-hACE2转基因小鼠10~20周龄时，感染SARS-CoV Urbani株并观察7 d后发现,感染小鼠体质量平均下降了20%以上,并且病毒在肺和脑保持了强劲复制，研究者预测hACE2转基因小鼠死亡的主要原因为致命性脑炎。
3 C57BL/6 JxC3H/HeJ背景的hACE2转基因小鼠
美国德克萨斯大学加尔维斯敦社区学院构建了5个转基因谱系的(C57BL/6JxC3H/HeJ)F1背景的hACE2转基因小鼠,分别命名为AC-12 、AC-22、AC-50、AC-63和AC-70, 主要应用其中的AC-22、AC-63及AC-70 转基因谱系进行相关实验。该hACE2转基因小鼠使用外源性的复合启动子CAG(带有CMV-IE增强子的鸡β-肌动蛋白启动子)启动人ACE2基因表达。该团队研究显示,此类hACE2转基因小鼠在肺、脑、心及肌肉等组织中均有hACE2mRNA表达，对SARS-CoV感染高度易感，可导致不同严重程度的疾病发生,部分家系甚至死亡；在5个转基因谱系中，AC-70转基因谱系小鼠病毒感染能力最强，免疫抵制最剧烈，但在研究中未发现弥散性肺泡损伤，Yoshikawa等推测该谱系转基小鼠最终死亡可能是因感染导致的致命性脑炎。
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